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2024-2025学年春学期基础医学科学研究技能 I 期末考试

约 1411 个字 预计阅读时间 5 分钟

本回忆卷未经授权禁止随意转载、用作商业用途

2024-2025学年春学期
基础医学科学研究技能 I 期末考试

基础医学回忆卷

本卷共配置26道题，满分为100分，时间2小时

选择题

  1. 实验室中以下哪个操作是不正确的：
    2. A. 使用移液枪枪头时候保持竖直
    B. 实验后清洁超净工作台台面
    C. 用嘴吹灭酒精灯
    D. 实验前阅读实验步骤

  2. PCR中各个阶段中，通常哪一步温度最低：
    3. A. 预变性
    B. 退火
    C. 延伸
    D. 最终延伸
    E. 变性

  3. PCR中引物作用：
    4. A. 为DNA聚合酶提供模板
    B. 为PCR反应提供能量
    C. 溶解DNA
    D. 与特定DNA片段配对，起始DNA合成

  4. 电泳DNA分子迁移速率主要取决于：
    5. A. 形状
    B. 长度
    C. 电荷量
    D. 纯度
    E. 碱基序列

  5. 质粒小提最后洗脱质粒所用的试剂：
    6. A. TE或去离子水
    B. 酚氯仿
    C. 乙醇
    D. 异丙醇
    E. 氯化钠溶液

  6. 限制酶识别切割序列的特点：
    7. A. 回文序列
    B. 随机序列
    C. 富含CG的序列
    D. 单一重复序列

  7. 在Western blot中，封闭的作用：
    8. A. 增强与一抗的结合
    B. 防止与非特异性抗体结合，降低背景信号
    C. 标记二抗
    D. 有利于显色

  8. 在分子克隆时，为得到含有目标质粒的细菌，会向培养基中加什么：
    9. A. 生长因子
    B. 抗生素
    C. 诱导剂
    D. 显色剂
    E. 缓冲液

  9. 在分子克隆时，载体的作用是：
    10. A. 携带目标基因进入细胞
    B. 扩增目标基因
    C. 标记目标基因
    D. 作为目标基因的模板

  10. 在SDS-PAGE实验中，SDS的作用？
    11. A. 作为还原剂，破坏蛋白质的二硫键
    B. 破坏蛋白质的二级和三级结构，使其均匀的带负电
    C. 使得蛋白带上正电

  11. 用什么染料对凝胶中的蛋白质进行染色？
    12. A. 银染
    B. 溴酚蓝
    C. 考马斯亮蓝
    D. 丽春红
    E. 苏丹红

  12. 什么是感受态细胞：
    13. A. 一定条件下，可以使细胞接受外来的质粒
    B. 可以进行细胞增殖

  13. 以下哪个是不正确的无菌操作：
    14. A. 用带手套的手触摸培养瓶内壁
    B. 倒平板等操作在酒精灯火焰旁进行
    C. 使用一次性无菌耗材
    D. 在超净工作台内打开试剂盖子
    E. 尽量不移动工作台内的物品

  14. 细胞传代的作用是：
    15. A. 诱导细胞分化
    B. 控制细胞密度，更新培养基
    C. 筛选目的细胞

  15. 在阿拉伯糖诱导表达的实验中，使用阿拉伯糖的目的：
    16. A. 稳定表达的蛋白产物
    B. 与AraC蛋白结合，诱导相应基因表达
    C. 作为培养的碳源

排序题

  1. 请为以下PCR步骤排序：
    2. A. 预变性
    B. 变性
    C. 退火
    D. 延伸
    E. 最终延伸

  2. 请为以下质粒克隆步骤排序：
    3. A. 挑菌培养
    B. PCR
    C. 细菌转化
    D. 质粒测序
    E. 连接载体和DNAinsert
    F. 从细菌中提取质粒
    G. 跑琼脂糖凝胶电泳测序，检测PCR产物
    H. DNA模版的提取与定量
    I. 生物信息学分析
    J. 切琼脂糖凝胶提取DNA

  3. 三种抗体蛋白分别为160kDa，60kDa和20kDa，请问三者在SEC色谱中的洗脱顺序：
    4. A. 160kDa
    B. 60kDa
    C. 20kDa

  4. 细胞转染的顺序是：
    5. A. 细菌与质粒混合
    B. 冰上30min
    C. 42摄氏度热激+冰上培养
    D. 加LB培养基培养
    E. 涂板后37摄氏度培养

  5. 质粒小提步骤的顺序是：
    6. A. 菌株提取
    B. 重悬
    C. 裂解
    D. 中和
    E. 离心上清
    F. 过柱
    G. 漂洗
    H. 洗脱

计算题

  1. 有一个六孔板进行细胞转染，已知DNA质粒溶液为1μg/μL。六孔板的培养基为2mL，每个孔需要加入1μg的DNA质粒。
    2. (i). 一共需要加入多少微克的DNA质粒
    (ii). 一共需要多少微升的DNA质粒溶液
    (iii). 已知脂质体与DNA的比例为3μL：1μg，一共需要需要多少微升转染试剂溶液?


  2. 要进行细胞传代。从培养皿上消化下来的细胞悬液有10mL，已知细胞浓度为2.5×10^6 cells/mL。传代后的每个培养皿5×10^4个细胞，共传代5个培养皿。
    3. (i). 现有细胞数总量是多少？
    (ii). 传代5个培养皿所需要的细胞总量是多少？
    (iii). 进行传代所需要取用的细胞悬液的体积是多少？


  3. 四个细胞计数板大方格的细胞数目分别是65，72，58，61，每个大方格的体积是0.1μl。细胞稀释倍数为5倍，那么原有液体当中1ml的细胞数是多少？


分析题

  1. 简述Sanger测序原理。为什么Sanger测序时要同时加dNTPs和ddNTPs？


  2. 在贴壁细胞的传代培养过程中为什么要用PBS洗三遍细胞？


  3. 你在研究一种药物，它可以抑制细胞内的Target X蛋白质。请用Western Blot实验，验证你的药物的抑制Target X蛋白能力。要求写出Western Blot的实验步骤，以及各步骤的目的。


致谢：

  • 浙江大学2024级基础医学(强基计划)2401、2402的同学们

祝用到这份回忆卷的你考试顺利！！